У двукрылых полное превращение. Их жизненный цикл складывается из стадий яйца, личинки (несколько возрастов), куколки и взрослого насекомого, или имаго. Большинство взрослых двукрылых тяготеют в условиях наших широт к биотопам с умеренной и даже повышенной влажностью. По этой причине они предпочитают держаться в зарослях кустарников, среди разнотравья лугов, по берегам водоемов. Лишь у части семейств выработались приспособления к жизни в засушливых ландшафтах.Многие мухи и комары — прекрасные летуны, способные покрывать значительные расстояния (иногда до нескольких десятков километров).Большинство двукрылых яйцекладущие, но у части высших мух известно яйцеживорождение, когда самка откладывает яйцо с полностью сформировавшейся в нем личинкой.